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產品詳情
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  • 產品名稱:ATCC CCL-89(AtT-20)

  • 產品型號:
  • 產品廠商:乾思生物
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簡單介紹:
ATCC CCL-89(AtT-20)
詳情介紹:

AtT-20細胞ATCC CCL-89標準細胞株基本信息

出品公司: ATCC
細胞名稱: AtT-20細胞, ATCC CCL-89細胞, AtT20細胞, 小鼠垂體瘤細胞
細胞又名: AtT20; AtT 20; ATT-20
存儲人: G Sato
種屬來源: 小鼠
組織來源: 垂體
疾病特征: 垂體瘤
細胞形態: 小的圓形細胞
培養基: RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022),90%;FBS,10%。
產品目錄號: CCL-89
生長條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37  ℃, 
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養基+10% DMSO,液氮儲存
支原體檢測: 陰性
**等級: 1
應用: 該細胞可以作為轉染宿主細胞。
參考文獻:
Buonassisi V, et al. Hormone-producing cultures of adrenal and pituitary tumor origin. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 48: 1184-1190, 1962. PubMed: 13874682
 
Furth J, et al. ACTH secreting transplantable pituitary tumors. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 84: 253-254, 1953. PubMed: 13121002
 
Tabernero C, et al. Identification of an RNA sequence within an intracisternal-A particle element able to replace Rev-mediated posttranscriptional regulation of human immunodeficiency virus type 1. J. Virol. 71: 95-101, 1997. PubMed: 8985327
 
Gamby C, et al. Growth-associated protein-43 (GAP-43) facilitates peptide hormone secretion in mouse anterior pituitary AtT-20 cells. J. Biol. Chem. 271: 10023-10028, 1996. PubMed: 8626556
 
細胞圖片:
AtT-20細胞圖片


AtT-20細胞ATCC CCL-89小鼠垂體瘤細胞特點和簡介

AtT20生長時不貼壁,而結成活細胞團。能抗脊髓灰質炎病毒。 檢測發現肢骨發育畸形病毒(鼠痘)陰性。 在本庫通過支原體檢測。

AtT-20細胞ATCC CCL-89小鼠垂體瘤細胞接受后處理

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發給我們。
  2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
  3) 棄去T25瓶中的培養基,添加 6ml本公司附帶的完全培養基。
  4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養 基。
  5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯 系。
 

AtT-20細胞ATCC CCL-89小鼠垂體瘤細胞培養操作

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然 后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養 過夜)。**天換液并 檢查細胞密度。
  2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。        1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
       2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶 中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落 ,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。      
     3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
       4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中 或者瓶中。
  3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
        1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
        2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞, 根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍 存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
       3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時 以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

AtT-20細胞ATCC CCL-89小鼠垂體瘤細胞培養注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述 現 象發生請及 時和我們聯系。
  2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、 所 需細胞因子 等,確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶 自行承擔。
  3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細 胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼 壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮 培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確認后我們為 您再免費寄送一次。
  4.   靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培 養,待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。
  5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細 胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
  6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和 Procell 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯 系 ,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
  7.該細胞僅供科研使用。


AtT-20細胞ATCC CCL-89標準細胞株說明書pdf版和相關資料下載

AtT-20細胞ATCC CCL-89標準細胞株應用舉例

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