產品詳情
簡單介紹：
ATCC CRL-2836(K7M2 wt)
詳情介紹：
K7M2 wt細胞ATCC CRL-2836標準細胞株基本信息
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 細胞名稱: | K7M2 wt細胞, ATCC CRL-2836細胞, K7M2wt細胞, 小鼠骨肉瘤成骨細胞 |
| 細胞又名: | K7M2 wt; K7M2 |
| 存儲人: | C Khanna |
| 種屬來源: | 小鼠 |
| 組織來源: | 骨 |
| 疾病特征: | 骨肉瘤 |
| 細胞形態: | 成骨細胞 |
| 培養基: | DMEM培養基(GIBCO,貨號12800017)，90%；FBS，10%。 |
| 產品目錄號: | CRL-2836 |
| 生長條件: | 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃, |
| 傳代方法: | 1：2至1：6，每周2次。 |
| 凍存條件: | 90% 完全培養基+10% DMSO，液氮儲存 |
| 支原體檢測: | 陰性 |
| **等級: | 1 |
| 應用: | 該細胞可以作為轉染宿主細胞。 |
| 參考文獻: |
Khanna C, et al. An orthotopic model of murine osteosarcoma with clonally related variants differing in pulmonary metastatic potential. Clin. Exp. Metastasis 18: 261-271, 2000. PubMed: 11315100
Khanna C, et al. Metastasis-associated differences in gene expression in a murine model of osteosarcoma. Cancer Res. 61: 3750-3759, 2001. PubMed: 11325848
Khanna C, et al. The membrane-cytoskeleton linker ezrin is necessary for osteosarcoma metastasis. Nat. Med. 10: 182-186, 2004. PubMed: 14704791
The K7M2 wt cell line was derived by intra-osseous injection of the K7 murine osteosarcoma cell line to the proximal tibia of a BALB/c mouse. The resultant primary tumor spontaneously metastasized to the lungs. A pulmonary metastasis was removed from the lung and then surgically implanted to a paraosteal tibial muscle flap of a naïve mouse. This cycle of implantation of pulmonary metastasis to paraosteal tibial muscle flap sites was repeated, resulting in the K7M2 primary tumor. This tumor was dissociated to a single cell suspension to create the K7M2 wt cell line
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K7M2 wt細胞ATCC CRL-2836小鼠骨肉瘤成骨細胞特點和簡介
抗原表達: CD31 陽性 [PubMed:1315100] 產物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表達顯示其骨家族細胞特性。 在本庫通過支原體檢測。K7M2 wt細胞ATCC CRL-2836小鼠骨肉瘤成骨細胞接受后處理
1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發給我們。2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養基，添加 6ml本公司附帶的完全培養基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
K7M2 wt細胞ATCC CRL-2836小鼠骨肉瘤成骨細胞培養操作
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
K7M2 wt細胞ATCC CRL-2836小鼠骨肉瘤成骨細胞培養注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題，責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和 Procell 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。