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產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
ATCC CCL-228(SW480)
詳情介紹：
SW480細(xì)胞ATCC CCL-228標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株基本信息
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 細(xì)胞名稱: | ATCC CCL-228細(xì)胞, SW480細(xì)胞, SW-480細(xì)胞, 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 |
| 種屬來源: | 人 |
| 組織來源: | 結(jié)腸 |
| 疾病特征: | Dukes'B型，結(jié)腸腺癌 |
| 患者年齡: | 50 |
| 患者性別： | 男 |
| 人種: | 高加索白人 |
| 細(xì)胞來源： | SW480是從原發(fā)性結(jié)腸腺癌中建立的。 |
| 抗原表達(dá): | HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3; blood type B |
| 癌基因： | myc +; myb + ; ras +; fos +; p53 +; sis -; abl -; ros -; src - |
| 基因表達(dá): | 癌胚抗原（CEA）908 ng/106個(gè)細(xì)胞/10天。CSAp（CSAp-）和結(jié)腸抗原3表達(dá)為陰性。 |
| 癌細(xì)胞誘導(dǎo)： | 能夠誘導(dǎo)癌細(xì)胞產(chǎn)生 |
| 誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn): |
是的，裸鼠，裸鼠皮下接種10的7次方個(gè)細(xì)胞后，21天內(nèi)腫瘤以100%的形成（5/5）。
|
| 細(xì)胞形態(tài): | 上皮樣 |
| 生長特性: | 貼壁生長 |
| 培養(yǎng)基: | L-15培養(yǎng)基，90%；FBS，10%。 |
| 產(chǎn)品目錄號(hào): | CCL-228 |
| 其他保藏庫編號(hào): | ATCC |
| 存儲(chǔ)人: | A Leibovitz |
| 生長條件: | 氣相：空氣；不需要二氧化碳; 溫度：37 ℃, |
| 傳代方法: | 1：2至1：6，每周2次。 |
| 凍存條件: | 90% 完全培養(yǎng)基+10% FBS，液氮儲(chǔ)存 |
| 支原體檢測(cè): | 陰性 |
| **等級(jí): | 1 |
| 應(yīng)用: |
該細(xì)胞系是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。本品系ras原癌基因第12密碼子突變，可作為PCR檢測(cè)該密碼子突變的陽性對(duì)照。
|
| 核型： | 染色體數(shù)目為亞三倍體，共有11-12條標(biāo)記染色體。在每一個(gè)被檢測(cè)的中期中，有8%的人同時(shí)觀察到雙著絲粒和雙著絲粒。 |
| 受體表達(dá)： | 表達(dá)表皮生長因子（EGF） |
| 癌基因表達(dá)： | myc +; myb + ; ras +; fos +; sis +; p53 +; abl -; ros -; src - |
| 基因表達(dá)： | 癌胚抗原（CEA）0.7 ng／10的6次方細(xì)胞/ 10天；角蛋白；轉(zhuǎn)化生長因子β，Myc+；Myb+；ras+；Fas+；SIS+；ABL-；ROS -；SRC--，HLA-A2，B8，B17；血型A；RH+，免疫酶染色法檢測(cè)細(xì)胞角蛋白陽性，該線陽性表達(dá)c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb，sis和fos癌基因。 |
| 致癌性： | 能夠誘導(dǎo)癌細(xì)胞產(chǎn)生，裸鼠皮下接種10的7次方個(gè)細(xì)胞后，21天內(nèi)腫瘤以100%的形成（5/5）。 |
| 病毒易感性： | 能夠感染HIV1病毒。 |
| STR: |
Amelogenin: X
CSF1PO: 13,14
D13S317: 12
D16S539: 13
D5S818: 13
D7S820: 8
THO1: 8
TPOX: 11
vWA: 16
|
| 同工酶: |
ES-D, 1
G6PD, B
PEP-D, 1
PGD, A
PGM1, 2
PGM3, 1
|
| 細(xì)胞說明： |
建立SW480細(xì)胞系后，從同一病人的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中獲得的癌細(xì)胞系就是見ATCC CCL-227細(xì)胞。
CSAp（CSAp-）和結(jié)腸抗原3呈陰性。
免疫過氧化物酶染色顯示細(xì)胞角蛋白陽性。
p53基因273密碼子中有一個(gè)G->突變導(dǎo)致Arg->His替換，309密碼子中有一個(gè)C->T突變導(dǎo)致Pro->Ser替換。
細(xì)胞表達(dá)高水平的p53蛋白。
c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos癌基因表達(dá)陽性。
未檢測(cè)到N-myc癌基因表達(dá)。
基質(zhì)溶血素，一種與腫瘤侵襲性相關(guān)的金屬蛋白酶，不表達(dá)。
據(jù)報(bào)道，這些細(xì)胞能產(chǎn)生GM-CSF。
許多SW480細(xì)胞在解凍后的頭幾天保持懸浮狀態(tài)是正常的，并且只是松散地附著在一起。這些細(xì)胞在L-15培養(yǎng)基中在大氣條件下培養(yǎng)。如果無法將培養(yǎng)箱專用于大氣培養(yǎng)，則可使用帶擰緊、無排氣塞密封蓋的組織培養(yǎng)瓶，以防止二氧化碳大氣進(jìn)入培養(yǎng)瓶。用新鮮培養(yǎng)基喂養(yǎng)時(shí)，這些細(xì)胞應(yīng)輕拿輕放，任何漂浮的細(xì)胞應(yīng)通過輕輕離心保留，并與粘附細(xì)胞一起添加回同一燒瓶中。漂浮細(xì)胞*終會(huì)附著并生長良好。將懸浮細(xì)胞丟失或?qū)⒓?xì)胞分成幾個(gè)燒瓶會(huì)使培養(yǎng)物稀釋，導(dǎo)致生長緩慢或完全停止。 |
| 參考文獻(xiàn): |
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| 細(xì)胞圖片： |
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SW-480人結(jié)腸癌細(xì)胞接受后處理
1) 收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng) 拍照片發(fā)給我們。
2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口 膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的 完全培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代， 傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn) 污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
SW-480人結(jié)腸癌細(xì)胞培養(yǎng)操作
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液 加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清 液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血 清和 DMSO ，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ) 存。記錄凍存 管位置以便下次拿取。
SW-480人結(jié)腸癌細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培 養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶壁脫落，將細(xì) 胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證 實(shí)細(xì)胞活力正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確 認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì) 胞匯合度 80% 左右時(shí)正常傳代。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以一定比例和客戶 自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術(shù) 部溝通交流。由 于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問 題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。